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Cell Biolabs:Cas13a蛋白ELISA检测试剂盒

发布者:艾美捷科技    发布时间:2021-10-27     
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说起DNA编辑,你会想到CRISPR/Cas9,那RNA编辑呢?今天就带大家认识一下RNA剪刀手CRISPR/Cas13a。

 

DNA编辑.jpg

 

2017年10月,张锋实验室首先证实CRISPR/Casl3a可靶向编辑哺乳动物体内RNA。比起RNAi,Casl3a有着更强的特异性,并且由于其对哺乳动物细胞而言是非内源性的,因此扰乱细胞中天然的转录后网络的可能性极低。大家都知道,Cas9是利用tracrRNA和crRNA来实现与DNA目标的结合和切割。不过,Cas13a(也叫C2c2)只需要24个碱基的crRNA,它通过富含尿嘧啶的茎环结构与Cas13a分子相互作用,并通过Cas13a的一系列构象变化来促进RNA目标的切割。

RNA目标的切割.jpg

 

Cas13a是VI型CRISPR-Cas系统效应蛋白,具有RNA介导的RNA酶切活性能靶向并切割与crRNA互补的RNA,该编辑系统作为一种新兴的治疗和诊断工具,在病毒性疾病和癌症等领域受到越来越多的关注。

 

如何快速有效的实现Cas13a蛋白的定量检测,作为专业的生命科学医药原料供应商,Cell Biolabs中国区金牌代理,艾美为您推荐:Cas13a蛋白ELISA检测试剂盒,实现Cas13a蛋白的定量检测。

 

货号PRB-5091
名称Cas13a (CRISPR Associated Protein 13a, C2c2) ELISA Kit
Cas13a 蛋白ELSIA检测试剂盒
检测灵敏度沙氏纤毛菌的Cas13a蛋白检测极限为31pg/mL
实验原理本试剂盒用于测量各种细胞和组织裂解液样本中沙氏纤毛菌的Cas13a蛋白的含量。试剂盒提供包被有抗Cas13a蛋白抗体的96孔板,在使用该试剂盒的测定中,样品中的Cas13a蛋白牢固且稳定地结合在孔上。然后加入生物素标记的Cas13a蛋白检测抗体和显色剂进行识别并显色。Cas13a的比例与吸光度的强度成比例。Cas13a的绝对量可以通过与Cas13a标准品进行比较来量化。
说明书

 

Cas13a 蛋白ELSIA检测试剂盒实验结果:

Cas13a-1.png

图1. Cas13a标准曲线

 

Cas13a-2.png

图2. 纯化的Cas13a重组蛋白。 泳道 1:SeeBlue Plus2 MW 标准品; 泳道2:重组Cas13a蛋白

 

重组的Cas13a蛋白的序列(下划线部分是用来免疫生产试剂盒抗体的序列):

MGNLFGHKRWYEVRDKKDFKIKRKVKVKRNYDGNKYILNINENNNKEKIDNNKFIRKYINYKKNDNIL KEFTRKFHAGNILFKLKGKEGIIRIENNDDFLETEEVVLYIEAYGKSEKLKALGITKKKIIDEAIRQG ITKDDKKIEIKRQENEEEIEIDIRDEYTNKTLNDCSIILRIIENDELETKKSIYEIFKNINMSLYKII EKIIENETEKVFENRYYEEHLREKLLKDDKIDVILTNFMEIREKIKSNLEILGFVKFYLNVGGDKKKS KNKKMLVEKILNINVDLTVEDIADFVIKELEFWNITKRIEKVKKVNNEFLEKRRNRTYIKSYVLLDKH EKFKIERENKKDKIVKFFVENIKNNSIKEKIEKILAEFKIDELIKKLEKELKKGNCDTEIFGIFKKHY KVNFDSKKFSKKSDEEKELYKIIYRYLKGRIEKILVNEQKVRLKKMEKIEIEKILNESILSEKILKRV KQYTLEHIMYLGKLRHNDIDMTTVNTDDFSRLHAKEELDLELITFFASTNMELNKIFSRENINNDENI DFFGGDREKNYVLDKKILNSKIKIIRDLDFIDNKNNITNNFIRKFTKIGTNERNRILHAISKERDLQG TQDDYNKVINIIQNLKISDEEVSKALNLDVVFKDKKNIITKINDIKISEENNNDIKYLPSFSKVLPEI LNLYRNNPKNEPFDTIETEKIVLNALIYVNKELYKKLILEDDLEENESKNIFLQELKKTLGNIDEIDE NIIENYYKNAQISASKGNNKAIKKYQKKVIECYIGYLRKNYEELFDFSDFKMNIQEIKKQIKDINDNK TYERITVKTSDKTIVINDDFEYIISIFALLNSNAVINKIRNRFFATSVWLNTSEYQNIIDILDEIMQL NTLRNECITENWNLNLEEFIQKMKEIEKDFDDFKIQTKKEIFNNYYEDIKNNILTEFKDDINGCDVLE KKLEKIVIFDDETKFEIDKKSNILQDEQRKLSNINKKDLKKKVDQYIKDKDQEIKSKILCRIIFNSDF LKKYKKEIDNLIEDMESENENKFQEIYYPKERKNELYIYKKNLFLNIGNPNFDKIYGLISNDIKMADA KFLFNIDGKNIRKNKISEIDAILKNLNDKLNGYSKEYKEKYIKKLKENDDFFAKNIQNKNYKSFEKDY NRVSEYKKIRDLVEFNYLNKIESYLIDINWKLAIQMARFERDMHYIVNGLRELGIIKLSGYNTGISRA YPKRNGSDGFYTTTAYYKFFDEESYKKFEKICYGFGIDLSENSEINKPENESIRNYISHFYIVRNPFA DYSIAEQIDRVSNLLSYSTRYNNSTYASVFEVFKKDVNLDYDELKKKFKLIGNNDILERLMKPKKVSV LELESYNSDYIKNLIIELLTKIENTNDTL

 

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